透析是一個簡單的擴散過程,溶質中小分子物質從高濃度溶液通過半透性膜擴散到低濃度溶液中,直滲透壓達到平衡。由于多孔膜的選擇性,使得溶質中小分子物質可以通過,而較大物質則被截留,從而分離出不同大小分子量的物質,依據(jù)分子量大小截留,可用于分離工藝,改變或控制透析的條件,可在多種透析應用中得到預期效果,通過截留分子量(MWCO)可使目標分子得到分離。所以透析袋分子量的選擇就決定了實驗的成敗。這篇文章就詳細介紹了如何選擇合適的透析袋。
透析膜的材質
透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜,主要有再生纖維素(RC)、纖維素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。但隨著生物技術發(fā)展,對透析袋處理樣品更多更嚴格的要求,根據(jù)生產工藝有可以分為標準膜和生物技術級膜。
生物技術纖維素酯(CE)膜
生物學惰性和超純的生物技術CE膜,用于帶電荷分子的分離及大分子純化。生物技術CE膜對條件及溶劑要求較高。一般而言,CE膜能夠抗弱的或稀的酸堿溶液和輕微乙醇,MWCO只有輕微改變。**直接與有機溶劑接觸會破壞CE膜。生物技術CE膜能在pH2-9與4-37℃下使用。即用透析裝置中也可使用CE膜。
生物技術再生纖維素(RC)膜
生物技術RC膜通過再生過程制得,物理抗性與化學相容性得到改良,具有與生物技術CE膜一樣高純度與均一的MWCO。RC膜能夠與高濃度的弱酸堿、低濃度的強酸堿、大多數(shù)醇類及一些溫和的或低濃度有機溶劑共用,**直接與強極性或有機溶劑接觸會破壞RC膜。生物技術RC膜能在pH2-12與4-60℃條件下使用。
生物技術聚偏二氟乙烯(PVDF)膜
疏水、惰性及無電抗性,生物技術PVDF膜是實驗室透析的革命性進步,能夠耐高溫(130℃)及溶劑條件。只有生物技術PVDF膜能夠經(jīng)受與大多數(shù)的酸堿(包括硝酸)和大多數(shù)的有機溶劑(包括DMF)直接接觸,**PVDF膜還具有*的高溫高壓蒸汽滅菌的能力,可熱封進行樣品分裝。
透析膜的選擇
1. 選擇合適的分子截留量(MWCO):由于透析膜由海綿狀橫向耦合的聚合物材料構成,截留性能間接的由孔徑等級即截留分子量(MWCO)表示,截留率90%的溶質分子大小可更的表示膜的MWCO。然而,溶質的滲透性亦取決于分子形狀、水合度、離子電荷與極性,推薦選擇膜的MWCO為欲截留物質分子量的一半,兩倍于透過物質的分子大小。
2. 選擇合適的形狀:根據(jù)需要,大程度的方便操作及樣品回收。
3. 選擇合適的膜:成功進行透析分離的關鍵是在適當?shù)臈l件下選用合適的膜。選擇時可參照下列:
o 根據(jù)目的選擇等級(生物技術或標準);
o 根據(jù)溶液的化學特性選擇膜材質(CE、RC或PVDF);
o 根據(jù)使用方法選擇產品類型(管狀、一次性或片狀);
o 根據(jù)溶質分子量在不同種MWCO中選擇;
o 根據(jù)目的選擇膜預處理方式;