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DAB顯色試劑盒(20×)說明書

發(fā)布日期: 2016-04-14
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DAB顯色試劑盒(20×)說明書

貨號DA1010

規(guī)格       

 

DA1010-3

DA1010-10 

溶液 A

3ml

10ml 

溶液 B

3ml

10ml

保存:   -20避光密閉保存,一年有效,避免反復(fù)凍融;短期可2-8保存。產(chǎn)品簡介:   二氨基聯(lián)苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是過氧化物酶(POD)的顯色底物,DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法,適用于辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的免疫印記或免疫組化反應(yīng)。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應(yīng),于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物免疫印記可直接在膜上顯示條帶;免疫組化標(biāo)本顯色時間一般為室溫5-20分鐘,隨后在顯微鏡下觀察顯色情況,顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時脫水封固,其終產(chǎn)物可直接在光鏡下觀察,也可經(jīng)OsO4處理后,增加反應(yīng)產(chǎn)物的電子密度,用于電鏡觀察。操作說明:

  • 對于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜,在與辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。
  • 取900μl PBS(或雙蒸水),加入50μl 溶液A,50μl 溶液B混合均勻,即配成DAB工作液。

如需要更大體積工作液,可按比例放大。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后避光保存,1小時內(nèi)使用,過期后請將剩余的液體廢棄。

  • 向組織切片或印記膜上加入適量DAB工作液,確保能充分覆蓋樣品。
  • 室溫避光孵育3-10 分鐘或更長時間,避免光照,直顯色預(yù)期深淺。
  • 去除DAB染色工作液,用蒸餾水洗滌2-3次即可終止顯色反應(yīng)。
  • 對于組織切片或細胞樣品,顯色反應(yīng)終止后,可對其進行其他染料復(fù)染。對于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室溫晾干避光保存。

注意事項:

  • DAB溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出,應(yīng)確保結(jié)晶*溶解再行使用。
  • 顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無色或淺棕色,如顏色過深,請勿使用。
  • 顯色時間嚴格控制,根據(jù)情況調(diào)整,以免顯色過度。固相膜顯色數(shù)小時后即會褪色,不能*存在。
  • DAB為可疑致癌物,請采取必要的防范措施。操作時應(yīng)戴手套,盡量避免與皮膚接觸,用后及時*沖洗,接觸DAB的實驗用品好經(jīng)洗液浸泡24h后使用。

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