細(xì)胞器標(biāo)志物抗體是細(xì)胞生物學(xué)中常用的研究工具。靶向特定的抗體有助于了解蛋白的亞細(xì)胞定位以及探究其生物功能,也可以在細(xì)胞器分離提取物的蛋白質(zhì)印跡分析中用作陽性對照。
過氧化物酶體(Peroxisome)是一種廣泛存在于真核生物細(xì)胞中的細(xì)胞器,由單層磷脂膜包裹,直徑約為0.2~1.0 μm,通常呈球形。它含有多種酶,包括利用氧分子產(chǎn)生過氧化氫(H?O?)的氧化酶和降解H?O?的過氧化氫酶。這些酶共同作用,使過氧化物酶體在細(xì)胞代謝和氧化還原平衡中發(fā)揮關(guān)鍵作用。過氧化物酶體在真核生物的各類細(xì)胞中普遍存在,尤其在肝細(xì)胞和腎細(xì)胞中數(shù)量特別多,Peroxisome在解毒作用、氧濃度調(diào)節(jié),脂肪酸的氧化和含氮物質(zhì)的代謝中起重要作用,除此之外在氧化還原、脂質(zhì)、炎癥通路調(diào)控中也發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
D-氨基酸氧化酶(D-Amino Acid Oxidase, DAO)是一種含有黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的氧化還原酶,主要通過氧化脫氫作用代謝中性和極性D-氨基酸,生成α-酮酸、氨和過氧化氫(H?O?)作為副產(chǎn)物。DAO在代謝、氧化應(yīng)激調(diào)節(jié)、神經(jīng)系統(tǒng)功能維持以及細(xì)胞衰老中發(fā)揮多方面的作用。
圖1 DAO抗體蛋白質(zhì)印跡分析結(jié)果示意圖
(貨號:K108235P)
過氧化氫酶(Catalase, CAT)是一種四聚體酶,由四個相同的亞基組成,每個亞基包含四個不同的結(jié)構(gòu)域和一個血紅素基團(tuán)。作為過氧化物酶體的標(biāo)志酶,CAT在過氧化物酶體中含量豐富,約占其酶總量的40%。其主要功能是將過氧化氫(H?O?)分解為水和氧,從而保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。CAT在細(xì)胞代謝和氧化還原平衡中的重要作用使其成為生物系統(tǒng)中重要的酶。
圖2 CAT抗體免疫組化結(jié)果示意圖
(貨號:K106726P)
過氧化物酶體生物發(fā)生因子3(Peroxisomal biogenesis factor 3, PEX3)是一種分子量約為42kDa的過氧化物酶體膜整合蛋白,其結(jié)構(gòu)包含兩個潛在的跨膜結(jié)構(gòu)域。PEX3的N端面向過氧化物酶體腔內(nèi),而C端則暴露于細(xì)胞質(zhì)中。作為過氧化物酶體膜形成的關(guān)鍵蛋白,PEX3在過氧化物酶體的生物發(fā)生、成熟和功能調(diào)節(jié)、細(xì)胞代謝和應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用。
圖3 PEX3抗體蛋白質(zhì)印跡分析結(jié)果示意圖
(貨號:K115450P)
已有一些蛋白被鑒定可用作過氧化物酶體標(biāo)志物(見表1)
表1 過氧化物酶體標(biāo)志物
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