鈣在人體內(nèi)大量存在,構(gòu)成骨骼作為支持人體的支架,在分泌、運(yùn)送、肌肉收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)等也起重要作用。許多染料可以于鈣形成螯合物, 包括茜素紅S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物,是茜素磺酸鈉鹽,它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物。鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法,Leagene 鈣鹽染色液采用Von Kossa硝酸銀法,其原理在于該法是一種金屬置換法,硝酸銀溶液作用于含有不溶性鈣鹽的切片時(shí),鈣被銀所置換,銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀,適用于大量樣本的鈣鹽組織染色。可用于顯示未經(jīng)脫鈣處理的冰凍、石蠟包埋組織的鈣鹽染色,及及培養(yǎng)的成骨細(xì)胞的礦化結(jié)節(jié)染色。鈣鹽染色液的操作步驟: 1、組織固定于中性福爾馬林或乙醇,常規(guī)脫水包埋。
2、切片至乙醇。
3、載玻片豎立放置,*風(fēng)干。
4、切片入含茜素紅S染色液的玻片染缸,浸染。
5、蒸餾水快速沖洗。
6、入固綠染色液復(fù)染。
7、蒸餾水沖洗。
8、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。
鈣鹽染色液的使用注意事項(xiàng):
1、鈣鹽組織固定以中性福爾馬林為佳。
2、作用時(shí)間取決于陽光照射時(shí)光的強(qiáng)度和時(shí)間。
3、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。