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小鼠白細(xì)胞介素-1β試劑盒使用時(shí)需要做什么處理?

發(fā)布日期: 2021-03-23
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  小鼠白細(xì)胞介素-1β試劑盒用于測(cè)定小鼠血清及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)含量。小鼠白細(xì)胞介素-1β試劑盒使用時(shí)的樣本應(yīng)做好如下處理:

  1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4C過(guò)夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20'C或-80C保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20C或-80C保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

  3.組織勻漿: 用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4中洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS (一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)- -步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000X g離心5~ 10分鐘,取上清檢測(cè)。

  4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20°C或-80C保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

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