PCR定量試劑盒是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時在線監(jiān)控反應(yīng)過程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對產(chǎn)物進(jìn)行分析，進(jìn)而對待測樣品模板進(jìn)行定量分析。
PCR定量試劑盒是從土壤農(nóng)桿菌CP4菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因，是轉(zhuǎn)基因植物研究中常用的一種篩選標(biāo)記基因，它具有下列特點(diǎn)：
1、即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2、根據(jù)鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒保守區(qū)域設(shè)計引物和探針，能專一性地檢測出樣品中的鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒成分，但不能檢測其他非鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒成分。
3、提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4、一管式閉管操作，降低了交叉污染。
5、快速，整個檢測過程（按一個樣品計）所需時間僅為2.0小時。
6、鈣試劑盒只能用于科研，足夠50次20uL體系的探針法熒光定量PCR。
其實(shí)PCR定量試劑盒在擴(kuò)增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán)。開始時，探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收，檢測不到熒光信號。
PCR擴(kuò)增時，Taq酶將探針酶切降解，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。
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